分析一：實驗室二抗主要的應用

    可以應用到幾乎所有類型的免疫檢測中，尤其是Western blot、免疫組織化學和免疫細胞化學。

    事實上，二抗在ELISA及流式細胞術中應用也很廣泛，不僅用于科學研究，而且廣泛的應用于臨床分析和疾病診斷。比較而言，二抗在免疫沉淀中的應用相對較少。以下內容是基于對所收集的二抗信息進行統計分析后得出的一些結論，對于您在具體的實驗中如何選擇*適合的抗體具有借鑒作用。

分析二：如何正確的選擇二抗

     ① 考慮因素：有一抗的物種、產生二抗的宿主、一抗的類別或亞類、二抗所耦聯的探針類型及二抗的形式等等。因此選擇哪種類型的二抗很大程度上決定于您所使用的一抗是什么，尤其針對種屬和類別而言。

     ② 與一抗的聯系：通常情況下，一抗可以在山羊、小鼠、兔子、大鼠及綿羊體內制備，其中屬小鼠及兔子*為常見，相應的，二抗的種屬也應當與一抗的相一致。而對于制備二抗的宿主，則應選擇另外一種不同的動物，一般選用驢、山羊、兔子、綿羊或其他較大的動物，可以實現二抗的大規(guī)模制備，其中又屬山羊使用*多。

     ③ 二抗類別或亞類的選擇：應遵循與一抗類別或亞類相一致的原則，其中抗IgG使用*多。這可能是因為除了五種類別的單克隆抗體外，很多一抗是多克隆抗體，屬于IgG類免疫球蛋白。此外anti-IgG可以識別幾乎所有類型的IgG亞類，因此，在不清楚一抗是屬于那個類別或亞類的時候，anti-IgG抗體是個不錯的選擇。

    此外，整個IgG分子是*常用的一種二抗分子形式，而F (ab’) 2片段或Fab片段一般僅用于特殊實驗中，如需要避免抗體與具有Fc受體的細胞結合的情況，或需要封閉內源性免疫球蛋白的時候。

    由于ELISA二抗所具備的優(yōu)點使得其在免疫學實驗中得以應用廣泛。對于二抗所耦聯的探針的選擇，主要取決于具體的實驗。對于Western blot，*常用的探針是HRP。

原創(chuàng)作者：上海恒遠生物科技有限公司