ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求。稍有疏漏,就會直接影響到實(shí)驗(yàn)的結(jié)果。近日,上海恒遠(yuǎn)的技術(shù)人員對ELISA實(shí)驗(yàn)的問題做出總結(jié),今天文章主要針對ELISA顯色淡的原因及解決方案做出分析。1.原因:試劑盒在運(yùn)輸途中時(shí)間太長,溫度太高。 解決方案:盡量縮短運(yùn)輸時(shí)間,夏季應(yīng)放冰塊降溫。2.原因:試劑盒未充分平衡。 解決方案:試劑盒從2~8℃冰箱取出后打開盒蓋,于室溫平衡至少20分鐘,確保所有試劑已平衡至室溫(約25℃)。3.原因:培養(yǎng)箱溫度不足37℃。 解決方案:注意培養(yǎng)箱溫度,放入反應(yīng)板后盡量減少開啟次數(shù)以免影響溫度恒定,非隔水式培養(yǎng)箱尤其應(yīng)注意。4.原因:保溫時(shí)間不足。 解決方案:校正定時(shí)鐘準(zhǔn)確定時(shí)。5.原因:洗滌時(shí)沖擊力太大、浸泡時(shí)間過長、洗滌次數(shù)增加。 解決方案:按說明書要求保留洗滌時(shí)間,準(zhǔn)確記住洗滌次數(shù)。6.原因:移液器吸液量不足,吸嘴內(nèi)壁掛水太多或內(nèi)壁不清潔。 解決方案:校正移液器,吸嘴要配套,裝吸嘴時(shí)要緊密,吸嘴內(nèi)壁要清潔,一次性使用。7.原因:蒸餾水水質(zhì)有問題。 解決方案:使用新鮮合格的蒸餾。8.原因:底物作用時(shí)間不足。 解決方案:準(zhǔn)確定時(shí)。 顯色一定要控制時(shí)間,根據(jù)試劑盒說明操作即可。一般來說,顯色時(shí)間過短,結(jié)果偏低;顯色時(shí)間過長,空白增高或者非特異性顯色增加。
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上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司是一家生物技術(shù)企業(yè),主要從事免疫學(xué)、分子生物學(xué)和常規(guī)生化試劑的研發(fā)、銷售,本公司可為您提供科研elisa試劑盒,種屬標(biāo)本齊全,有專門針對人血清、血漿、全血、分泌物、尿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、組織液等標(biāo)本的試劑盒;另有針對各種動物(鼠、兔、牛、馬、雞、豬、狗、山羊、猴、魚)的科研試劑。原創(chuàng)作者:上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司