血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養(yǎng)條件不同而異。胎牛血清是血清中的一種,是在屠宰懷孕母牛的時候,通過心臟穿刺采血獲取的胎牛的血清。胎牛血清是品質(zhì)的,因為胎牛還未接觸外界,血清中所含的
抗體、補體等對細胞有害的成分*少。
胎牛血清的主要作用
1.提供對維持細胞指數(shù)生長的激素,基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物,以及主要的低分子營養(yǎng)物。
2.提供結(jié)合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他激素等,能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。
3.有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,起到解毒作用。
4.是細胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來源。
5.起酸堿度緩沖液作用。
6.提供蛋白酶抑制劑,使在細胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活,保護細胞不受傷害。
胎牛血清的選擇
1.顏色
根據(jù)血紅蛋白含量的不同,胎牛血清可表現(xiàn)出黃色或紅色,我國的細胞培養(yǎng)用血清標準是不高于20mg/dl,實際上,血紅蛋白含量的高度對血清并無直接影響,這個指標的意義在于能體現(xiàn)出采血過程中嚴謹規(guī)范程度,良好的操作能降低血清的溶血。
進口胎牛血清或多或少總有點溶血,因為真正的胎牛血清凝血功能差,紅細胞容易破裂。
總的來說,國產(chǎn)的血清總呈現(xiàn)出蠟黃,進口的血清質(zhì)量的呈現(xiàn)出淡黃、微紅色。當然熱滅活血清或保存不當?shù)难澹捎诩t蛋白的破壞氧化,會呈現(xiàn)出暗紅,甚至咖啡色。
2.沉淀
很多血清客戶,會發(fā)現(xiàn)
進口血清有沉淀,從而懷疑血清的質(zhì)量問題,這是沒有根據(jù)的。
血清中的沉淀是由纖維蛋白凝聚產(chǎn)生,對血清質(zhì)量沒有任何影響,沉淀的產(chǎn)生原因很多,和廠家的加工生產(chǎn)方式密切相關(guān)。
國產(chǎn)的血清,大多來自北方,由于價格低廉,保存環(huán)境都不好,從采血、冷凍、運輸?shù)缴a(chǎn)經(jīng)過多次凍融,就會析出部分纖維蛋白沉淀,這樣,血清成品過濾后看起來反而更加的“干凈”,很少有沉淀產(chǎn)生。
進口的胎牛血清過濾分裝前很少會反復(fù)凍融,生產(chǎn)后的成品也是清澈的,但隨著時間的推移,血清中大量纖維蛋白會析出形成沉淀,當然,進口的新生牛血清,一般牛年齡在2周左右,血清中的各種大量纖維蛋白含量明顯偏高,生產(chǎn)后血清可能會渾濁,甚至有大量沉淀。
當然,購買回來的血清都是冷凍狀態(tài),使用時需要融化,融化過程在溫度較低的狀態(tài)下慢慢融化,否則沉淀相對較多,雖然沉淀并不直接影響血清的質(zhì)量,但對細胞的顯微觀察有一定的阻礙。
3.澄清度
進口胎牛血清由于蛋白和脂類等物質(zhì)含量低,標簽為稀薄、清淡,而國產(chǎn)血清,因為絕大多數(shù)是新生牛血清,相對而言更加粘稠,顏色略深,對于初步接觸血清的人很難判斷,但把兩者進行對比,可容易分辨。